山梨酸|山梨酸钾|脱氢醋酸钠|烟酸|烟酰胺|乙酰乙酰苯胺--南通醋酸化工股份有限公司
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食品中山梨酸、苯甲酸的测定方法
发布时间:2015-05-04
      摘要:山梨酸是国际粮农组织和卫生组织推荐的高效安全的防腐保鲜剂,广泛应用于食品、饮料、烟草、农药、化妆品等行业,作为不饱和酸,也可用于树脂、香料和橡胶工业。

      1 主题内容与适用范围

      本标准规定了酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定方法。

      本标准适用于酱油、水果汁、果酱等食品中山梨酸、苯甲酸含量的测定。

      最低检出浓度:气相色谱法最低检出量为1μg,用于色谱分析的样品为1g时,最低检出浓度为1mg/kg。

      第一篇 气相色谱法第一法

      2 原理

      样品酸化后,用乙醚提取山梨酸、苯甲酸,用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定,与标准系列比较定量。

      3 试剂

      3.1 乙醚:不含过氧化物。

      3.2 石油醚:沸程30~60℃。

      3.3 盐酸。

      3.4 无水硫酸钠。

      3.5 盐酸1+1:取100mL盐酸,加水稀释至200mL。

      3.6 氯化钠酸性溶液40g/L:于氯化钠溶液40g/L中加少量盐酸1+1酸化。

      3.7 山梨酸、苯甲酸标准溶液:准确称取山梨酸、苯甲酸各0.2000g,置于100mL容量瓶中,用石油醚—乙醚3+1混合溶剂溶解后并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于2.0mg山梨酸或苯甲酸。

      3.8 山梨酸、苯甲酸标准使用液:吸取适量的山梨酸、苯甲酸标准溶液,以石油醚-乙醚3+1混合溶剂稀释至每毫升相当于50,100,150,200,250mg山梨酸或苯甲酸。

      4 仪器

      气相色谱仪:具有氢火焰离子化检测器。

      5 分析步骤

      5.1 样品提取

      称 取2.50g事先混合均匀的样品,置于25mL带塞量筒中,加0.5mL盐酸1+1酸化,用15,10mL乙醚提取两次,每次振摇1min,将上层乙醚提 取液吸入另一个25mL带塞量筒中。合并乙醚提取液。用3mL氯化钠酸性溶液40g/L洗涤两次,静止15min,用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入 25mL容量瓶中。加乙醚至刻度,混匀。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL带塞刻度试管中,置40℃水浴上挥干,加入2mL石油醚-乙醚3+1混合溶剂溶 解残渣,备用。

      5.2 色谱参考条件

      5.2.1 色谱柱:玻璃柱,内径3mm,长2m,内装涂以5%m/mDEGS+1%m/mH3PO4固定液的60~80目Chromosorb W AW。

      5.2.2 气流速度:载气为氮气,50mL/min氮气和空气、氢气之比按各仪器型号不同选择各自的最佳比例条件。

      5.2.3 温度:进样口230℃;检测器230℃;柱温170℃。

      5.3 测定

      进样2μL标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中,可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰高,以浓度为横坐标,相应的峰高值为纵坐标,绘制标准曲线。

      同时进样2μL样品溶液。测得峰高与标准曲线比较定量。

      5.4 计算式中:X1——样品中山梨酸或苯甲酸的含量,g/kg;

      m1——测定用样品液中山梨酸或苯甲酸的质量,μg;

      V1——加入石油醚-乙醚3+1混合溶剂的体积,mL;

      V2——测定时进样的体积,μL;

      m2——样品的质量,g;

      5——测定时吸取乙醚提取液的体积,mL;

      25——样品乙醚提取液的总体积,mL。

      由测得苯甲酸的量乘以1.18,即为样品中苯甲酸钠的含量。

      结果的表述:报告算术平均值的二位有效数。

      5.5 允许差

      相对相差≤10%。

      5.6 其他

      在色谱图中山梨酸保留时间为2分53秒;苯甲酸保留时间为6分8秒。

      (图略)

      第二篇 高效液相色谱法第二法

      6 原理

      样品加温除去二氧化碳和乙醇,调pH至近中性,过滤后进高效液相色谱仪,经反相色谱分离后,根据保留时间和峰面积进行定性和定量。

      7 试剂

      方法中所用试剂,除另有规定外,均为分析纯试剂,水为蒸馏水或同等纯度水,溶液为水溶液。

      7.1 甲醇:经滤膜0.5μm过滤。

      7.2 稀氨水1+1:氨水加水等体积混合。

      7.3 乙酸铵溶液0.02mol/L:称取1.54g乙酸铵,加水至1000mL,溶解,经滤膜0.45μm过滤。

      7.4 碳酸氢钠溶液20g/L:称取2g碳酸氢钠优级纯,加水至100mL,振摇溶解。

      7.5 苯甲酸标准储备溶液:准确称取0.1000g苯甲酸,加碳酸氢钠溶液20g/L5mL,加热溶解,移入100mL容量瓶中,加水定容至100mL,苯甲酸含量为1mg/mL,作为储备溶液。

      7.6 山梨酸标准储备溶液:准确称取0.1000g山梨酸,加碳酸氢钠溶液20g/L5mL,加热溶解,移入100mL容量瓶中,加水定容至100mL,山梨酸含量为1mg/mL,作为储备溶液。

      7.7 苯甲酸、山梨酸标准混合使用溶液:取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL,放入100mL容量瓶中,加水至刻度。此溶液含苯甲酸、山梨酸各 0.1mg/mL。经滤膜0.45μm过滤同时测定糖精钠时可加GB/T 5009.28中3.4糖精钠标准储备溶液。

      8 仪器

      高效液相色谱仪带紫外检测器。

      9 分析步骤

      9.1 样品处理

      9.1.1 汽水:称取5.00~10.0g样品,放入小烧杯中,微温搅拌除去二氧化碳,用氨水1+1调pH约7。加水定容至10~20mL,经滤膜0.45μm过滤。

      9.1.2 果汁类:称取5.00~10.0g样品,用氨水1+1调pH约7,加水定容至适当体积,离心沉淀,上清液经滤膜0.45μm过滤。

      9.1.3 配制酒类:称取10.0g样品,放入小烧杯中,水浴加热除去乙醇,用氨水1+1调pH约7,加水定容至适当体积,经滤膜0.45μm过滤。

      9.2 高效液相色谱参考条件

      9.2.1 色谱柱:YWG-C184.6mm×250mm10μm不锈钢柱。

      9.2.2 流动相:甲醇:乙酸铵溶液0.02m0l/L5:95。

      9.2.3 流速:1mL/min。

      9.2.4 进样量:10μL。

      9.2.5 检测器:紫外检测器,波长230μm,灵敏度0.2AUFS。

      根据保留时间定性,外标峰面积法定量。

      9.3 计算式中:X2——样品中苯甲酸或山梨酸的含量,g/kg;

      m3——进样体积中苯甲酸或山梨酸的质量,mg;

      V4——进样体积,mL;

      V3——样品稀释液总体积,mL;

      m4——样品质量,g。

      结果的表述:报告算术平均值的二位有效数。

      9.4 允许差:相对相差≤10%。

      9.5 其他

      同GB/T 5009.28的5.6。

      注:本方法可同时测定糖精钠。

      第三篇 薄层色谱法第三法

      10 原理

      样品酸化后,用乙醚提取苯甲酸、山梨酸。将样品提取液浓缩,点于聚酰胺薄层板上,展开。显色后,根据薄层板上苯甲酸、山梨酸的比移值,与标准比较定性,并可进行概略定量。

      11 试剂

      11.1 异丙醇。

      11.2 正丁醇。

      11.3 石油醚:沸程为30~60℃。

      11.4 乙醚:不含过氧化物。

      11.5 氨水。

      11.6 无水乙醇。

      11.7 聚酰胺粉:200目。

      11.8 盐酸1+1:取100mL盐酸,加水稀释至200mL。

      11.9 氯化钠酸性溶液40g/L:于氯化钠溶液40g/L中加少量盐酸1+1酸化。

      11.10 展开剂。

      11.10.1 正丁醇+氨水+无水乙醇7+1+2。

      11.10.2 异丙醇+氨水+无水乙醇7+1+2。

      11.11 山梨酸标准溶液:准确称取0.2000g山梨酸,用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中,并稀释至刻度,此溶液每毫升相当于2.0mg山梨酸。

      11.12 苯甲酸标准溶液:准确称取0.2000g苯甲酸,用少量乙醇溶解后移入100mL容量瓶中,并稀释至刻度,此溶液每毫升相当于2.0mg苯甲酸。

      11.13 显色剂:溴甲酚紫-乙醇50%溶液0.4g/L,用氢氧化钠溶液4g/L调至pH=8。

      12 仪器

      12.1 吹风机。

      12.2 层析缸。

      12.3 玻璃板:10cm×18cm。

      12.4 微量注射器:10μL,100μL。

      12.5 喷雾器。

      13 操作方法

      13.1 样品提取

      称 取2.50g事先混合均匀的样品,置于25mL带塞量筒中,加0.5mL盐酸1+1酸化,用15,10mL乙醚提取两次,每次振摇1min,将上层醚提取 液吸入另一个25mL带塞量筒中,合并乙醚提取液。用3mL氯化钠酸性溶液40g/L洗涤两次,静止15min,用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入 25mL容量瓶中。加乙醚至刻度,混匀。吸取10.0mL乙醚提取液分两次置于10mL带塞离心管中,在约40℃的水浴上挥干,加入0.10mL乙醇溶解 残渣,备用。

      13.2 测定

      13.2.1 聚酰胺粉板的制备:称取1.6g聚酰胺粉,加0.4g可溶性淀粉,加约7mL水,研磨3~5min,立即倒入涂布器内制成10cm×18cm、厚度0.3mm的薄层板两块,室温干燥后,于80℃干燥1h,取出,置于干燥器中保存。

      13.2.2 点样:在薄层板下端2cm的基线上,用微量注射器点1μL、2μL样品液,同时各点1μL、2μL山梨酸、苯甲酸标准溶液。

      13.2.3 展开与显色:将点样后的薄层板放入预先盛有展开剂11.10.1或11.10.2的展开槽内,展开槽周围贴有滤纸,待溶剂前沿上展至10cm,取出挥干, 喷显色剂,斑点成黄色,背景为蓝色。样品中所含山梨酸、苯甲酸的量与标准斑点比较定量山梨酸、苯甲酸的比移值依次为0.82,0.73。

      13.3 计算式中:X3——样品中苯甲酸或山梨酸的含量,g/kg;

      m5——测定用样品液中苯甲酸或山梨酸的质量,mg;

      V5——加入乙醇的体积,mL;

      V6——测定时点样的体积,mL;

      m6——样品质量,g;

      10——测定时吸取乙醚提取液的体积,mL;

      25——样品乙醚提取液总体积,mL。

      注:本方法还可以同时测定果酱、果汁中的糖精。

      第四篇 禁用防腐剂定性试验第四法

      14 硼酸、硼砂

      14.1 试剂

      14.1.1 盐酸1+1:量取盐酸100mL,加水稀释至200mL。

      14.1.2 碳酸钠溶液40g/L。

      14.1.3 氢氧化钠溶液4g/L:称取2g氢氧化钠,溶于水并稀释至500mL。

      14.1.4 姜黄试纸:称取20g姜黄粉末,用冷水浸渍4次,每次各100mL,除去水溶性物质后,残渣在100℃干燥,加100mL乙醇,浸渍数日,过滤。取1cm×8cm滤纸条,浸入溶液中,取出,于空气中干燥,贮于玻璃瓶中。

      14.2 分析步骤

      14.2.1 样品处理

      称取3~5g固体样品,加碳酸钠溶液40g/L充分湿润后,于小火上烘干、炭化后再置高温炉中灰化。量取10~20mL液体样品,加碳酸钠溶液40g/L至呈碱性后,置水浴上蒸干、炭化后再置高温炉中灰化。

      14.2.2 定性试验

      14.2.2.1 姜黄试纸法:取一部分灰分,滴加少量水与盐酸1+1至微酸性,边滴边搅拌,使残渣溶解,微温后过滤。将姜黄试纸浸入滤液中,取出试纸置表面皿上,于 60~70℃干燥,如有硼酸、硼砂存在时,试纸显红色或橙红色,在其变色部分熏以氨即转为绿黑色。

      14.2.2.2 焰色反应

      取灰分置于坩埚中,加硫酸数滴及乙醇数滴,直接点火,硼酸或硼砂存在时,火焰呈绿色。

      15 水杨酸

      15.1 试剂

      15.1.1 三氯化铁溶液10g/L。

      15.1.2 亚硝酸钾溶液100g/L。

      15.1.3 乙酸50%。

      15.1.4 硫酸铜溶液100g/L。称取10g硫酸铜CuSO4?H2O,加水溶解至100mL。

      15.2 分析步骤

      15.2.1 样品提取

      按GB/T 5009.28中9.1操作,将乙醚提取液蒸干后,残渣备用。

      15.2.2 定性试验

      15.2.2.1 三氯化铁法:残渣加1~2滴三氯化铁溶液10g/L,水杨酸存在时显紫堇色。

      15.2.2.2 确证试验:溶解残渣于少量热水中,冷后加4~5滴亚硝酸钾溶液100g/L,4~5滴乙酸50%及1滴硫酸铜溶液100g/L,混匀,煮沸0.5h,放置片刻,水杨酸存在时呈血红色苯甲酸不显色。

(来源:中国化工仪器网)